Etude des interactions entre protéines et lésions de l''ADN par SPRi

Les l sions de l'ADN sont un d fi pour les syst mes de r paration cellulaire. Parmi ceux-ci le syst me de r paration par excision de bases (BER) assure la reconnaissance et le retrait de la base l s e. Avec la r sonance plasmonique de surface par imagerie (SPRi), nous disposons d'une technique d'analyse en temps r el, sans marquage avec laquelle nous avons pu observer des interactions parall lis es d'une prot ine enzymatique purifi e (Fpg, OGG1, EndoIV ou Ape1) vis- -vis de diff rentes l sions sur des oligonucl otides de synth se immobilis s sur une surface d'or. Les dommages tudi s sont une base oxyd e (8-oxoG), une base cyclis e (cycload nine) et des analogues de sites abasiques (THF et C3). Nous avons galement tudi leur action sur des l sions multiples, associant les bases 8-oxoG et 8-oxoA sur le m me brin d'ADN. L'originalit de notre dispositif associe l'analyse directe de l'interaction ADN/prot ine et l'approche indirecte de sa cons quence par une strat gie d'hybridation et d'amplification du signal. Les r sultats obtenus permettent d'envisager l' tude de la r paration simultan e par des extraits cellulaires ou tissulaires humains.