Biosynteza, charakterystyka i oczyszczanie taninazy grzybowej

Tanaza lub hydrolaza acylowa taniny (E.C. 3.1.1.20) jest enzymem niezb¿dnym dla przemys¿u, wykorzystywanym w przemy¿le spo¿ywczym i farmaceutycznym, a tak¿e w procesach bioremediacji. Grzyby s¿ jednym z najwi¿kszych producentów taninazy w¿ród wszystkich mikroorganizmów. Aspergillus alliaceous, nowo wyizolowany szczep grzyba z próbki gleby, zidentyfikowany zostä jako producent enzymu taninazy. W zoptymalizowanych warunkach maksymalna ilo¿¿ taninazy zostäa wyprodukowana metod¿ fermentacji zanurzeniowej. Enzym taninowy produkowano w pod¿o¿u selektywnym, zwanym minimalnym pod¿o¿em Czapka-Doxa, uzupe¿nionym kwasem taninowym jako ¿ród¿em w¿gla. Parametry hodowli, takie jak pH, temperatura, wielko¿¿ inokulum, by¿y optymalizowane pod k¿tem produkcji taninazy. Maksymaln¿ produkcj¿ taninazy zaobserwowano przy pH 6,0, temperaturze inkubacji 300C i wielko¿ci inokulum 0,5ml po 96 godzinach inkubacji. Wytworzon¿ tanin¿ oczyszczono cz¿¿ciowo przez str¿canie sol¿ siarczanu amonu i dializ¿. Enzym z cz¿¿ciowym oczyszczeniem poddano charakterystyce enzymatycznej. Charakteryzacja enzymu obejmuje wp¿yw pH, temperatury, stabilno¿ci temperaturowej i substratu na enzym.